硝酸纖維素膜又稱(chēng)為NC膜97成视频在线网， 在膠體金試紙中用做C/T線(xiàn)的承載體www99Q12COm免费下载毛片网站，同時(shí)也是免疫反應(yīng)的發(fā)生處高清一区二区三区视频。

硝酸纖維素膜的原理：

硝酸纖維素膜是蛋白印跡最廣泛使用的轉(zhuǎn)移介質(zhì)国产高清在线a视频大全在线，對(duì)蛋白有很強(qiáng)的結(jié)合能力，而且適用于各種顯色方法欧美乱肏，包括同位素欧美黑人巨大最猛性XXXXX，化學(xué)發(fā)光（Luminol類(lèi)）、常規(guī)顯色特级婬片A片AAA毛片AA1、染色和熒光顯色；背景低欧美性交黄色一级视频A片，信噪比高久久黄色視頻。NC膜的使用也很簡(jiǎn)便，比如不需要甲醛預(yù)處理26uuu网址，只要在無(wú)離子水面浸潤(rùn)排出膜內(nèi)氣泡97干干干，再在電泳緩沖液中平衡幾分鐘就可以了；比如NC膜很容易封閉亚洲区在线，也不需要特別嚴(yán)謹(jǐn)?shù)那逑礂l件www牛逼叉mmm。轉(zhuǎn)移到NC膜上的蛋白在合適的條件下可以穩(wěn)定保存很長(zhǎng)時(shí)間，不過(guò)要注意的是純的硝纖膜在比較脆国产精品美女久久久网站大一红，又容易卷人人妻人人操日日夜，操作要小心，不適合用于需要多次重復(fù)清洗的用途--因?yàn)榻?jīng)不起多次“折磨”久久精品国产精品免费专区。

選擇硝酸纖維素膜的的注意事項(xiàng)：

1.選擇硝纖膜時(shí)要注意的是選擇合適的孔徑欧美顶级作爱视频，通常20KD以上的大分子蛋白用0.45um孔徑的膜，小于20KD的話(huà)建議選擇0.2um的日韩精品一区二区三区在线播放，如果小于7KD的話(huà)最好選擇0.1um的膜亚欧无码专区精品久久久。

2.還要注意選擇純的NC膜--混有含醋酸纖維（CM）的NC膜結(jié)合力會(huì)有所降低。選擇硝纖膜時(shí)要注意的是選擇合適的孔徑亚洲片免费一级A片，通常20KD以上的大分子蛋白用0.45um孔徑的膜特色特黄色片，小于20KD的話(huà)建議選擇0.2um的日日插日日干日日透，如果小于7KD的話(huà)最好選擇0.1um的膜。

硝酸纖維素膜的應(yīng)用技巧：

1. 蛋白與膜的結(jié)合原理蛋白與膜的結(jié)合原理, 已知的結(jié)合力包括疏水作用力\H鍵\靜電作用力等,確切的結(jié)合原理并不明確,主要靠假說(shuō)來(lái)支撐.

主要有兩種假說(shuō):

1) 首先兩者靠靜電作阻力結(jié)合, 然后靠H鍵和疏水作用來(lái)維持長(zhǎng)時(shí)間結(jié)合.

2) 首先兩者靠疏水作用結(jié)合, 然后靠靜電作用來(lái)維持長(zhǎng)時(shí)間結(jié)合.兩條假說(shuō), 都表明其結(jié)合過(guò)程分為兩步, 首先結(jié)合和后面長(zhǎng)時(shí)間結(jié)合.由于結(jié)合原理的不明確性, 導(dǎo)致在這方面的工作非常依賴(lài)實(shí)踐經(jīng)驗(yàn).

2. 生物原料,緩沖溶液的試劑和配方

1) 生物原料, 作為CT線(xiàn)的生物原料使用情況各異,所以這里只做略述.首先,單克隆抗體與膜的結(jié)合優(yōu)于多克隆抗體, 主要時(shí)由于多克隆抗體有很多不同的表面位點(diǎn), 而各位點(diǎn)與膜的最佳結(jié)合條件都有細(xì)微的差別, 毫無(wú)疑問(wèn)就增加了優(yōu)化難度.其次,分子量越大,蛋白越難結(jié)合到固相材料上

2)緩沖液大家最關(guān)心的可能就是希望獲得一個(gè)性能優(yōu)良的配方,包括緩沖液,封閉液等等處理溶液配方.其實(shí)我也無(wú)法提供給你一個(gè)萬(wàn)用配方清單. 因?yàn)椴煌姆磻?yīng)體系需要不同的配方來(lái)支持, 而不同機(jī)構(gòu)的反應(yīng)體系又有差異. 想獲”魚(yú)”先學(xué)”漁”. 為了不誤導(dǎo)大家,我在下面涉及到配方的問(wèn)題上,僅提供思路,具體配方請(qǐng)自己摸索.緩沖液的構(gòu)成一般是: PBS(或其他緩沖體系)+作用物質(zhì)(針對(duì)某一特定問(wèn)題)+PH調(diào)整. 我在參考過(guò)以前的各種資料后,個(gè)人意見(jiàn)為配方原則為宜簡(jiǎn)不宜繁,根據(jù)自己的需要添加作用物質(zhì),原來(lái)的很多需要添加的作用物質(zhì),由于膜制造技術(shù)的改進(jìn)已經(jīng)不再需要.推薦的緩沖體系為0.01M PBS PH7-7.2, 該緩沖體系對(duì)多種抗原抗體都有良好的適應(yīng)性.作用物質(zhì)的情況大致羅列如下:少量NACL,減少信號(hào)強(qiáng)度,消假陽(yáng).有機(jī)醇(甲醇,異丙醇等),潤(rùn)濕膜,減少膜帶有的靜電,利于結(jié)合包被.個(gè)人不推薦,因制膜工藝改進(jìn).表面活動(dòng)劑(TW20,TX100),增加親水力,可避免線(xiàn)條中空現(xiàn)象,也可增色.糖,保護(hù)劑,減緩老化速度,也可以增加親水力同上.調(diào)PH到某個(gè)位置,可以消假陽(yáng).

3. 點(diǎn)樣環(huán)境環(huán)境濕度對(duì)點(diǎn)膜過(guò)程非常重要.最佳濕度一般在45-65%.濕度過(guò)低,膜上容易聚集靜電荷,點(diǎn)膜容易出現(xiàn)散點(diǎn),導(dǎo)致測(cè)試會(huì)出現(xiàn)疏水斑.濕度過(guò)高,膜上毛細(xì)作用加強(qiáng),點(diǎn)膜容易引起CT線(xiàn)變寬甚至擴(kuò)散.為了保證點(diǎn)樣時(shí)膜濕度的均一性,一般在點(diǎn)樣前把膜放到該濕度條件下平衡一段時(shí)間.

4. 點(diǎn)樣儀器與膜面情況的關(guān)系目前有兩種點(diǎn)樣方式,劃膜式和非接觸點(diǎn)膜式.非接觸點(diǎn)膜式優(yōu)于劃膜式,進(jìn)口劃膜式優(yōu)于國(guó)產(chǎn)劃膜式.因劃膜式為軟管將抗體劃到膜表面,而膜本身的物理性質(zhì)為軟脆,劃管會(huì)在其表面留下印痕.進(jìn)口的劃膜機(jī)由于使用的材料和控制系統(tǒng)較好,所以留下的劃痕較輕,而國(guó)產(chǎn)儀器較差,留下的劃痕也就比較嚴(yán)重. 劃痕容易對(duì)層析的金標(biāo)復(fù)合物形成阻力,導(dǎo)致假陽(yáng)性. 同時(shí)容易出現(xiàn)跑板時(shí)在T線(xiàn)位置出現(xiàn)若有若無(wú)一條細(xì)線(xiàn)(鬼線(xiàn)),而跑板結(jié)束后鬼線(xiàn)消失的奇怪現(xiàn)象.

5. 膜的寬度與點(diǎn)樣位置膜的寬度一般有18mm(or 20mm)和25mm兩種, 分別使用在做測(cè)試條和做測(cè)試板上.然而,不同的T線(xiàn)點(diǎn)樣位置將帶來(lái)不同的靈敏度. 點(diǎn)樣位置上移,金標(biāo)復(fù)合物通過(guò)T線(xiàn)位置時(shí)速度變慢,反應(yīng)時(shí)間增加,靈敏度升高. 反之靈敏度降低. 這個(gè)方法可以用來(lái)改變靈敏度和消除假陽(yáng)性.

6. 溶液在膜上的擴(kuò)散溶液在膜上的點(diǎn)樣量一般情況下為1ul/cm.溶液在膜上的擴(kuò)散是趨向兩端的,噴點(diǎn)上去的是均勻的抗體溶液,但當(dāng)干燥時(shí)線(xiàn)條邊緣的干燥速度高于中間,中間的抗體會(huì)不斷向兩邊擴(kuò)散,所以干燥后抗體是向線(xiàn)條的兩端聚集的.一般情況下不影響你的試驗(yàn).如果你發(fā)現(xiàn)線(xiàn)條出現(xiàn)兩端紅,中間淡的現(xiàn)象,就要考慮這個(gè)問(wèn)題了.可以加如上面說(shuō)的作用物質(zhì)來(lái)解決.

7. 點(diǎn)膜前后的封閉作用從供應(yīng)商處購(gòu)買(mǎi)回的膜基本上都是已經(jīng)優(yōu)化處理好的,直接點(diǎn)膜就可使用.然而我們還是經(jīng)常會(huì)遇到關(guān)于封閉的討論.其實(shí)封閉不象大家認(rèn)為的那樣,一封閉什么問(wèn)題都解決了. 老問(wèn)題走了新問(wèn)題又來(lái)了,而且更麻煩,我要說(shuō)的是慎用封閉.我極其反對(duì)點(diǎn)膜前封閉的做法. 原因?yàn)閺S(chǎng)家在生產(chǎn)膜時(shí)候,各種配方是混合加入原漿的.而點(diǎn)膜前封閉時(shí)要將膜浸泡在封閉液內(nèi),必然擾亂了膜內(nèi)正常的物質(zhì)分布.由此引發(fā)了許多問(wèn)題,也降低了工作效率. 也有廠(chǎng)家遇到不封閉就無(wú)法包被上膜的問(wèn)題,其實(shí)可以通過(guò)其他辦法來(lái)解決,封閉必然是下測(cè).我經(jīng)常使用的封閉手法有兩種.流動(dòng)封閉,將作用物質(zhì)處理在樣品墊上.膜上定點(diǎn)封閉,將作用物質(zhì)配成溶液噴點(diǎn)在膜的特定位置上. 該方法需要使用BIODOT的AIRJET噴頭.可以將不合格的半成品大板重新復(fù)活.只要是將封閉做在了膜上,就必然會(huì)對(duì)產(chǎn)品的穩(wěn)定性造成影響.具體的影響程度要通過(guò)穩(wěn)定性測(cè)試來(lái)評(píng)判

8. 膜的儲(chǔ)存剛生產(chǎn)出的膜一般含有5-10%的水分. 關(guān)于膜的老化機(jī)理,有個(gè)理論支持,不過(guò)爭(zhēng)議比較大. 理論認(rèn)為:膜的老化是因?yàn)槟ど系乃终舭l(fā),使膜變得疏水,帶電荷并變脆. 儲(chǔ)存膜一般要求是20±5℃黄色视频ⅹⅹxⅹ，55±10R%.過(guò)干或過(guò)濕都不利.在這種保存條件下,一般可以放置三年以上. 但是如果膜上做了封閉處理,就要根據(jù)具體試驗(yàn)情況來(lái)判斷了.有些膜由于生產(chǎn)工藝的問(wèn)題,使用后靈敏度會(huì)在一段時(shí)間內(nèi)發(fā)生變化,遇到這種問(wèn)題,就需要在點(diǎn)膜后放置一段時(shí)間,待穩(wěn)定后方可進(jìn)入調(diào)試生產(chǎn)欧美黄片A久久999。